农业大咖谈检测：HPLC-ELSD法检测大豆卵磷脂方法的优化

       说到磷脂，其实并不陌生。高中生物学中我们就了解了磷脂的生理作用。磷脂是人体细胞的基本组成成分，对神经、生殖、激素有着重要的生理作用。市面上也会经常见到磷脂类保健品。

       磷脂是一种纯天然营养保健食品, 来源极为广泛, 主要存在于动、 植物的细胞之中, 是生物细胞膜的主要成分, 动物体中含量多的有心、 肝、脑、 肾、 骨髓和卵等; 植物体中以油料作物种子含量较为集中,大豆卵磷脂（Lecithin High Potency ），又称大豆蛋黄素，是精制大豆油过程中的副产品，是通过溶剂萃取然后离心分离后通过醇洗得到。

       纯天然的卵磷脂主要是从豆类及豆类制品中获取。市面上粒状的大豆卵磷脂是大豆油在脱胶过程中沉淀出来的磷脂质，再经加工、干燥之后的产品。大豆卵磷脂中含有卵磷脂、脑磷脂等，具延缓衰老、预防心脑血管疾病等作用。大豆卵磷脂可增强细胞信息传递能力，从而提高大脑活力，提升细胞膜自我修复能力来保护肝脏。

       关于卵磷脂的检测及前处理设备的选择，我们特邀请专业丰富的马挺军老师为我们做详细的介绍。

       专家简介：

       马挺军，博士，北京农学院 食品科学与工程学院 教授； 2007年入选北京市科技新星，2011年入选北京市中青年骨干教师，2015年贵州省千人创新人才。现任北京农学院食品科学与工程学院副院长，农业生物制品与种业中关村开放实验室副主任。

       研究领域：杂粮与功能油脂加工、功能食品及天然产物提取、低温等离子冷杀菌与保鲜

       学术团体兼职：

       中国环境学会绿色包装分会 副主任委员；

       中国农业机械学会检验检测分会 副主任委员；

       中国食品科学技术学会植物基分会 理事

       中国农业工程学会农产品加工与贮藏工程分会 理事

       北京食品学会 监事；

       中国农学会杂粮分会 常务理事；

       中国作物学会燕麦荞麦分会 常务理事；

       中国作物学会藜麦分会 常务理事。

       主持科研课题30余项。发表科研论文100余篇，第一作者授权发明专利8项，实用新型专利1项；第一作者主编《杂粮营养价值与综合利用》、《荞麦发酵食品》、《金黄米抗氧化功能成分》等专著3本，参编专著《中国苦荞》、《中国荞麦学》、《中国燕麦学》、《粮油加工工艺学》、《食品添加剂》。

       马挺军老师介绍到，关于卵磷脂的检测方法很多，目前采用比较多的有高效液相色谱法，紫外分光光度法，红外吸收光谱法、薄层层析法等。其中《大豆及制品中磷脂组分和含量的测定高效液相色谱法》是2011年12月1日实施的一项行业标准。高效液相色谱法以其快速、灵敏，易于自动化等优点，常被科研工作者采用作为检测手段。但由于卵磷脂的紫外吸收波长较低(205 nm)，处于紫外吸收波长的末端，容易受其他溶剂的干扰。采用蒸发光散射检测器（ELSD），选用HPLC-ELSD检测超声波法和超临界法提取的大豆卵磷脂，对大豆卵磷脂含量的高效液相色谱法测定进行了改进，精密度试验和加样回收率试验证实该方法准确、可靠，可为深入研究大豆卵磷脂的含量以及大豆和豆制品的综合利用开发提供理论依据和技术指导。

       超声方法优点是快捷，萃取结果重复性好，误差小。但超声萃取杂质较多，卵磷脂纯度比超临界萃取法提取的卵磷脂纯度低。所以在选用高效液相色谱法检测超声波法提取的卵磷脂含量时一定要注意流动相比例的选择。试验中某一流动相比例的变化，是基于参考文献以及笔者试验经验所得，如果更深入进行流动相的分析，对试验研究则更有参考意义。

       经试验，确定检测超声波萃取卵磷脂流动相最佳配比为：V(异丙醇)/V(正己烷)/ V(水)= 54:28:10，卵磷脂与样品中其他组分完全分离，峰型良好；确定检测超临界萃取卵磷脂流动相最佳配比为：V(异丙醇)/V(正己烷)/ V(水)= 53:28:10，卵磷脂与样品中其他组分完全分离，峰型良好。

       色谱分离过程是吸附剂、溶质和流动相三者间相互作用的结果。液相色谱的选择性并不单纯地取决吸附剂的化学性质、颗粒大小和形状、及被分离的溶质，还和流动相的组成成份的各自性质和浓度存在密切的关系，它对色谱分离起着不可忽视的重要作用。本试验色谱分离属于液-固吸附层析，其中，吸附剂的性质由正相硅胶柱的性质决定；正己烷属无氢键型溶剂，极性较低，在它和溶质分子间只存在色散作用力(范德华力)和诱导作用力，根据高效液相层析法的基本概念和分离理论正己烷作为底剂，起决定基本色谱的分离作用；异丙醇由于具有黏性，极性较强，作为洗脱剂，起调节试样组份的滞留长短并对试样中某几个组份具选择性的作用。同一吸附剂性质下，溶剂对溶质分子的选择性是非常显著和重要的。

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       相关标准下载：GBT 35867-2018 粮油检验-卵磷脂中磷脂含量的测定高效液相色谱蒸发光散射检测法 

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       保健品及特医食品的法规与质量安全

       推荐检测机构（卵磷脂检测）：

       迪信泰检测科技（北京）有限公司