移液器的正确使用与日常保养

       1如何装枪头 

       有没有觉得新的移液器每次打枪头的声音特别像吃鸡游戏里M24狙击枪的开枪声--清脆舒服。但如果你还使劲在枪头盒子上敲几下来插上枪头，就赶紧收手吧，不然你的M24很快就要变成散弹枪了。。。。。。因为长时间这样做会导致枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住甚至会将枪弹射套筒折断。

       正确的做法应该是：将枪垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动1/4或1/2圈即可使其紧密结合。多道（如8道或12道，有钱人家）的移液枪，可将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略微超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。

       2如何调节量程 

       从大到小，按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；从小到大，则先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度（继续旋转活塞按钮约1/3圈），再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度（伟大而博学的导师教我的）。在该过程中，不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。通常，移液器推荐在35-100%量程范围内操作。

       3高精度润洗的重要性

       不知道大家有没有遇到过这种情况，枪头明明插紧了，手上的操作明明是缓慢进行，但还是会肉眼可见的抽取液体的体积不够，排除人为操作失误（也就是说，你真的不会用枪），还要注意是否进行了润洗。除了普通液体润洗以外，在吸取有机溶剂或高挥发性液体时，挥发性气体会在白套筒室内形成负压，从而产生漏液的情况，这时就需要预洗4~6次，让白套筒室内的气体达到饱和，负压就会自动消失。注：高温或者低温（冰点以下）液体请不要润洗。

       4如何移液

       讲了这么多，重点来了，移液器不就是为了移液嘛

       1）移液浸入的角度：保持垂直状态，最多不能超过20°。倾斜吸液会造成气压面的改变，增大移液误差。

       2）枪头浸入深度：枪头正确的浸入深度可以有效的减少取液误差。

       3）吸液速度：匀速。过快的吸液速度，容易使样品形成漩涡，产生气泡；样品液易进入套柄，对活塞和密封圈造成损伤，除了损伤移液器，这一点也很容易造成污染，细胞间曾因为这种操作失误，让正常的细胞株里混入了肿瘤细胞。。。。。。特别是1ml以上的液体，很容易造成液体上冲。吸完后最好能在液面内停留1-3秒。

       4）排液及吹液：

       排液：将活塞按压至第一档；

       吹液：继续下压活塞按钮，到达第二档或者直接按到底。（大家应该理解我说的第一档和第二档是什么意思，但是我有点质疑导师讲的这一点到底对不对，因为我之前的排液和吸液完全是反着的啊。。。。。。）

       5）移液器使用完毕，必须卸掉枪头后才可以挂在实验台上，以防止任何残留的液体都会在平放时倒流回吸液杆。

       5如何维护与保养

       一个物件的使用寿命，总的来说，6分靠正确的使用方法，4分就要靠正确的保养了，所以请佛系用枪。

       1）如果移液器每天都需要使用，则建议每三个月或半年清洁并校准一次。

       2）如较长时间不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧，不注意此点容易导致活塞无法回弹。

       3）如液体不小心进入活塞室需及时清除污染物（这是公德心！）。

       4）在吸取过高挥发、高腐蚀液体后，应将整支移液器拆开，用蒸馏水冲洗活塞杆及白套筒内壁，并在晾干后安装使用，以免挥发性气体长时间吸附于活塞杆表面，对活塞杆产生腐蚀，损坏移液器。

       留的液体都会在平放时倒流回吸液杆。

       6注意事项

       （1）当我们碰到吸取粘稠液体的时候，该怎么办？

       日常实验中，我们偶尔会吸取高粘稠的液体，比如说TWEEN-20，或者是高粘度的蛋白，在用枪吸取的时候，常常会感觉液体吸取的很慢，打出的时候又很容易残留液体，吹不干净，还容易一不小心吸到枪里。这里给大家介绍两种方式：

       1、无论枪头的体积是适用于多少，枪头口都很细小，这也是造成粘稠液体难以吹打的原因之一。所以我们可以用剪子把枪头的尖口处剪掉，然后再去吸取粘稠液体；

       2、我们可以在枪的第二个卡顿点处时吸液，在第一个卡顿点处吹出液体。这样做就可以弥补挂在枪头处的部分液体；

       3、如果实验室有条件的话，可以使用外置活塞式移液器，也就是油枪，小编也只是听说过，并没有见过。但是这种移液器不但可以准确地吸出高粘度液体，还可以移取容易起泡的液体，很牛逼的样子。

       （2）加少量的液体时，总是有一点很难打出，怎么办？

       有时候在配制大体积液体，遇到这种情况，也就马马虎虎的糊弄过去了，但是在做PCR实验加样时，本身每一步加的量就很少，再有一点残存在枪头里，误差就太大了。遇到这种情况，解决的方法如下：

       1、使用进口枪头（高品质、超低吸附）；

       2、你可能要检查一下自己的移液器了，它的密封性可能出了问题；

       3、请你的老板买一个“油枪”给你。

       （3）吸取液体时，总会有气泡，怎么办？

       这一点小编也很奇怪，吸取大体积的液体时很少遇到这种情况，但是吸取的液体体积越小，越容易出现气泡的情况，尤其是在PCR加样时，一般这种情况的原因有很多，对症下药就好了：

       1、可能是你的枪头和枪并没有接触严密；

       2、没有将枪插到液面下面，所以你在吸取液体的时候自然而然就会吸进去空气；

       3、加样速度太快，没有吸满液体就把枪拿出来；

       4、SDS这类的表面活性剂很容易气泡。

       （4）如果不小心把液体吸进枪里，该怎么办？

       这就是所谓的倒吸，是用枪的大忌。如果不小心吸进去了液体，一定要及时清理，不然会使枪体生锈、腐蚀影响精准度、如果实验室里有用废的枪，可以那它练手，学着拆卸移液器，这样出现问题的时候，可以自己修理。

       （5）学会如何自检移液器

       日常实验室中比较方便的自检方法：

       1、可以分别检测一把移液器的最大量程、50%的量程和10%的量程吸取的液体的质量，每个量程测三次，取平均值；

       2、根据当时的环境温度，将三个平均值分别乘以水的密度系数，这样就可以得到相应的体积，应用的就是初中学到的密度=质量/体积的公式；

       3、之后就可以把计算出的体积和枪的精准度比较了。