关于质谱技术与操作的若干问题！

       质谱技术在类固醇激素检测中的优势特别明显，但需实验室自行建立参考范围。因为样本往往不易获得，大多数实验室会参考国外的参考范围。在引用国外的参考范围时需注意哪些方面？是否需考虑不同的人种，饮食，地域，文化带来的差异？

       专家意见1：针对检测小分子类固醇激素，质谱方法需要建立自己实验室的参考区间，其中除了性别、年龄、生理周期外，还需注意民族的差异。
专家意见2：实验室在采用国外参考区间时须评估分析系统的可比性和实验项目人群的可比性，并对参考区间进行转化或验证。验证时应评估所采用的参考区间是否适用于本实验室所提供服务的人群。可参考CLSI EP28-A3，通过采集至少20份当地健康志愿者样品，采用简单的非参数检验统计方法进行验证。若没有可借鉴的或其他来源的参考区间，则必须自行建立参考区间，最少为120份正常人样本。

       问题二

       使用质谱技术进行药物浓度检测时，除了原药本身，有些代谢物也是具有活性的，对于这种情况，活性代谢物浓度是否需要跟原药浓度同步检测？报告单上如何提示？

专家意见1：首先要确定药物浓度检测的必要性，根据实际临床需求制定检测的内容。如评估药物在体内的药代动力学,需要同步检测原药和其代谢物。
专家意见2：需要同步检测。一般情况下报告单上可以显示原药浓度、活性代谢产物浓度，以及两者的和。

       问题三

       近几年质谱技术发展迅速，听起来似乎所有的项目都可以检测，在医院特别是基层医院开展质谱检测的难点在哪里？质谱检测如何做到像试剂盒检测项目一样简单、易操作？在质量管控、一致化和标准化方面，有哪些挑战?

       专家意见1：首先医院或者实验室要评估开展质谱技术的必要性，特别是目前医疗资源紧缺的情况下，只有对报告周期有要求，对检测项目或者检测结果有强烈需求的情况下，才会评估使用质谱技术。更多情况下，特别是基层医院，可采取转诊或者外送等方式进行处理。
如开展质谱平台的必要性较强，需储备设备、相关试剂盒和专业技术人员。因为技术的特点，就算是使用试剂盒，多数情况下也需要调整方法，满足临床需求，在保证量值溯源的情况下，还要做到严格的质量管理。
       专家意见2：质谱技术测量领域确实非常广泛，但对于临床实验室而言，并不是所有项目都适合用质谱技术进行测定。对于基层医院而言，开展质谱检测的难点可能主要还是:

       （1）仪器价格昂贵，检测成本较高；
       （2）质谱大多是LDT方法，缺乏试剂盒，缺乏质谱相关的专业技术人员；

       （3）个别项目检测样本量可能不足以维持仪器的正常运转。
       要让质谱技术像常规生化分析一样简单易操作，目前还不现实，需要依靠技术的进步。目前已有针对质谱法的自动化设备，包括自动取样、自动样本处理、自动离心机等，但是这些设备比较昂贵，且技术还没有实现常规检验分析那样的自动化和便捷。同时缺少可以溯源的校准品、具有互通性的质控品，国内外的质谱方法的EQA计划也较少。但近些年来，国内外在此方面取得很大的进展，以我国为例，已研制了多种甾体激素、电解质、小分子物质的有证参考物质，并且开展了包括甾体激素、儿茶酚胺类物质、新生儿筛查等项目的EQA计划，开展了糖化血红蛋白、肾素醛固酮等标准化计划(参见“《质谱检测项目相关的室间质量评价实践》中华检验医学杂志，2020,43（12）)。相信在临床质谱实验室、EQA机构、参考溯源实验室等机构人员的重视和共同努力下，质谱项目实现自动化和标准化指日可待。
       专家意见3：主要难点是遇到仪器故障如何识别和排查。试剂的配制与仪器的使用维护均需要有经验的、具备专业知识的人才，人才的匮乏、检测样本量低等，将导致设备运行困难、运行成本高等问题。

       问题四

       伴随着质谱技术近些年来的突飞猛进，质谱技术已经颠覆了传统临床微生物实验室的工作流程，极大缩短了病原微生物的鉴定时间。如果质谱技术能应用于检测病原菌耐药蛋白,从而推断该病原菌的药敏模式，那将会彻底颠覆传统临床微生物实验室的工作流程，这特别值得期待。根据目前研发经验来看,有没有这种应用的可能性?如果有，还要研发多久才能彻底颠覆传统临床微生物实验室鉴定、药敏的工作流程？

       专家意见：目前在快速的微生物鉴定方面，质谱技术应用较为完善，但也不能完全取代传统培养鉴定的方法。质谱技术在药敏检测方面的应用还是存于研究阶段，特别是原理和机制方面并未有实质性的进展，这也制约了该技术的应用发展。

       问题五

       目前，质谱广泛应用在第三方，但在医院普及还需要一些时间。未来质谱能否取代一些病理诊断，提供更精确的疾病诊断服务？

       专家意见1：目前质谱技术在小分子检测方面优势明显，可以在技术上与传统检测方法互补，但在病例诊断方面还是以研究为主，如肿瘤边缘组织的鉴别等。质谱技术更多是弥补和完善其他的诊断方案。
       专家意见2：疾病诊断需要病理诊断和多种检测共同辅助，各技术手段之间是互补关系，而非相互替代关系。质谱检测可以为某些疑难病的诊断提供有益的补充，从而提高疾病诊断的精准性。