生物安全柜的基础知识

生物安全柜（Biological safety cabinets，BSCs）是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护工作人员、实验室环境以及实验品，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。WHO出版的《实验室生物安全手册》中明确说明：“生物安全柜可以有效减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物交叉污染，生物安全柜同时也能保护工作环境”。

一、安全柜型号的规定

EN12469 对一级、二级和三级生物安全柜的分类、性能和检测有明确的规定：

一级生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样，不同之处在于排气口安装有HEPA 过滤器。所有类型的生物安全柜都在排气和进气口使用HEPA 过滤器。一级生物安全柜本身无风机，依赖外接通风管中的风机带动气流，由于不能保护柜内产品，目前已较少使用。

二级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型，通过HEPA 过滤器的洁净气流从安全柜顶部垂直吹下，通过工作区域，在到工作人员的呼吸区域前被俘获。气流在放空前将被过滤。所有的二级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护。

三级生物安全柜是为4 级实验室生物安全等级而设计的，柜体完全气密，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称手套箱(Golve box)，试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生物试验。

二、常用Ⅱ级安全柜的选型

Ⅱ级安全柜有前窗操作口,向安全柜内流入的气流用于人员保护,经高效过滤器过滤的下降气流用于产品保护,安全柜内气流经高效过滤器过滤后排出用于环境保护。安全柜按排放气流占系统总流量的比例及内部设计结构分为A1、A2、B1、B2共四种类型。

A1 型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.38m/s。70%气体通过HEPA 过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排除。

A2 型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA 过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排除。

Ⅱ级B 型生物安全柜均为连接排气系统的安全柜。连接安全柜排气管的风机连接紧急供应电源，目的在断电下仍可保持安全柜负压，以免危险气体泄漏如实验室。其前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s(100fpm)。B1 型70%气体通过排气口HEPA 过滤器排除，30%的气体通过供气口HEPA 过滤器再循环至工作区。B2 型为100%全排型安全柜，无内部循环气流，可同时提供生物性和化学性的安全控制。

生物安全柜的检测的情况发生在：

安装检验：安全柜安装完成、位置移动后

常规维护检验：至少每年一次、更换过滤器和内部部件维修后

过滤器完整性检测：

1 目的

本试验测定安全柜过滤器安装结构（包括下降气流HEPA过滤器、排气HEPA过滤器、过滤器外罩和框架）的完整性。

2 试剂

邻苯二甲酸二辛酯（DOP）或与之相当的液体即可以产生与DOP气溶胶颗粒尺寸分布相同气溶胶颗粒的液体，如：聚α-烯(PAO)、 (2-乙基已基)癸二酸二酯、聚乙二醇以及药物级的轻矿物油。

3 仪器

a) 线性或对数刻度的气溶胶光度计，可以将过滤器上游气流中浓度为10μg/L DOP（或相当液体）多分散气溶胶微粒标示为100%，能检测1×10-3%同一气溶胶微粒，光度计应按其生产商的使用说明进行校准；

b) 将气溶胶发生器的压力调至最小140kPa，使用DOP或与之相当的液体发生气溶胶。发生器喷嘴浸入液体的深度应不超过25mm。

c) 气溶胶发生器的压力计最大量程为0-550 kPa，分辨率和精确度为7kPa。 发生器压力计由生产厂家校准或按照厂家的使用说明校准。

4 方法

4.1 可以扫描检测的过滤器

a) 运行安全柜的风机和灯（下降气流过滤器测试），去掉过滤器的散流装置和保护盖（如果有），安放气溶胶发生器，将气溶胶导入安全柜，产生均匀分布过滤器上游气流。

b) 打开气溶胶光度计，按厂商使用说明进行调整；

c) 对含有气溶胶的过滤器上游气流进行测试，证实该浓度气溶胶的光散射强度至少应等于由10μg/L DOP产生的光散射强度，

-如果是线性刻度的光度计（0-100分度），将读数调整为100，

-如果是对数刻度的光度计，将上游气流浓度的读数调整在1×104以上（利用仪器校准曲线）；

d) 光度计探针在过滤器下游距过滤器表面不超过25mm，以小于50mm/s的扫描速率移动，使探针扫测过滤器的整个下游气流一侧和每个组合过滤片的边缘，扫测路线应略微重叠。围绕整个过滤器外围、沿组合过滤片和框架的连接处以及围绕过滤器和其它部件之间的密封处仔细检查。要求过滤器在任何点的漏过率应不超过0.01%。

4.2 不可扫描检视的过滤器

排气过滤器泄漏的泄漏测试是在能产生充分混合气溶胶的下游气流位置的管道上钻一直径大约10mm的孔，将带有硬伸长管的光度计探针插入孔中进行。要求过滤器在任何点的漏过率应不超过0.005%。